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摘要
背景:腺相关病毒(AAV)载体是将治疗性基因传递至视网膜的最有希望的载体。为了开发实用的基因传递工具,通常需要在特定细胞类型中实现高的AAV转导效率。在某些应用(例如光遗传疗法)中,需要在视网膜双极细胞中AAV介导的靶向表达,但是,内源性细胞特异性启动子驱动的转导效率通常较低。需要开发可以提高双极细胞中AAV转导效率的方法。 目的:该研究旨在检查蛋白酶体抑制剂对视网膜双极细胞中AAV介导的转导效率的影响。 方法:定量分析荧光报告蛋白的表达,以评估两种蛋白酶体抑制剂阿霉素和MG132对AAV介导的小鼠视网膜双极细胞转导效率的影响。 结果:我们的结果表明,阿霉素可以以剂量依赖性方式增加视网膜双极细胞中AAV的转导效率。我们还观察到了视网膜神经元中阿霉素介导的细胞毒性,但可通过右旋右雷佐生的联合应用减轻细胞毒性。与阿霉素(300μM)和右雷佐生共同应用三个月后,视网膜双极细胞中AAV的转导效率提高了33.8%,并且在视网膜的所有层中均未观察到细胞毒性。 结论:阿霉素可提高体内视网膜双极细胞的AAV转导效率。右雷佐生可以部分减轻阿霉素对视网膜神经元的潜在长期细胞毒性。阿霉素和右雷佐生的共同应用可作为潜在的佐剂方案,以提高视网膜双极细胞中AAV的转导效率。
关键词: 腺相关病毒,视网膜基因治疗,阿霉素,右雷佐生,视网膜,双极细胞。
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